为了获得剔除柚皮苷(naring in)的中药方剂四逆散样品以供其药理活性探讨时使用, 制备了抗柚皮苷抗体的 免疫亲和色谱柱, 用于特异性地剔除四逆散中的柚皮苷。 首先合成了柚皮苷的完全抗原 柚皮苷与牛血清白蛋 白的结合物 naringin-BSA, 并用 naringin-BSA对新西兰兔进行免疫获得抗血清, 再将其纯化后与经 CNBr活化的 Sepharose 4B凝胶共价偶联制成免疫亲和色谱柱。 将四逆散提取物样品溶液上样该色谱柱, 洗脱, 制得特异性剔 除了柚皮苷的四逆散样品。由检测结果可知, naringin-BSA 被成功合成。 将其用于免疫新西兰兔, 获得的抗血清 的效价经酶联免疫吸附法(ELISA)测定达到 1∶30 000, 抗体 IgG 的纯度达 94%, 交叉反应率低。 在 IgG 与 Sepha- rose 4B合成的 IgG-Sepharose免疫亲和色谱柱中, IgG 的偶联率为 87%。 用该免疫亲和色谱柱处理四逆散后, 其 中所含的柚皮苷几乎完全被剔除。 结果证明, 利用抗柚皮苷免疫亲和色谱, 能特异性地剔除四逆散或其他样品中 的柚皮苷成分。